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凍干機(jī)樣品預(yù)凍的原因是什么？

凍干機(jī)的樣品為什么要預(yù)凍？首先，了解下凍干機(jī)的工作原理，是將含水物質(zhì)，先低溫凍結(jié)，使水轉(zhuǎn)變?yōu)楸?，然后在較高真空下將冰轉(zhuǎn)變?yōu)槠麘B(tài)，升華出來，以去除水份而保存物質(zhì)的方式。

所謂預(yù)凍，就是把含有大量水分的產(chǎn)品凍結(jié)成固體的過程。

預(yù)凍的目的有三個：

其一，固定產(chǎn)品，如果產(chǎn)品沒能凍結(jié)成固體即直接抽真空，在真空制冷作用下，當(dāng)真空抽到一定的時候，溶解在水中的空氣會“沸騰"起泡，產(chǎn)品從容器中逸出，到壓力低于6.11mbar時，產(chǎn)品則凍結(jié)成冰，但沒有固定的形狀，玻璃容器甚至還會破裂，凍干失敗。

其二，形成有利于升華的結(jié)晶，已知凍干產(chǎn)品大都數(shù)是溶液，可能不止一種成分，有些還含有蛋白質(zhì)、生物體等生物活性物質(zhì)，在凍結(jié)時有可能會形成玻璃態(tài)，產(chǎn)品在干燥一段時間后，會形成上層的干燥層和下層的凍結(jié)層，凍結(jié)層的產(chǎn)品繼續(xù)干燥時，升華的氣流必需通過干燥層，由于玻璃態(tài)幾乎無間隙，升華氣流沒有通道，產(chǎn)品的繼續(xù)干燥將受到影響，干燥失敗。其三，保證所有產(chǎn)品獲得相同的細(xì)微結(jié)構(gòu)，凍干時通常應(yīng)把所有的產(chǎn)品冷凍到某一低溫，進(jìn)箱溫度一般是5 ℃，并持續(xù)一段時間，確保所有產(chǎn)品達(dá)到同一溫度后再一起降溫預(yù)凍，使所有產(chǎn)品的冷凍工藝相同，防止造成產(chǎn)品結(jié)構(gòu)不均顏色不一等情況。為使產(chǎn)品在真空下升華時不會鼓泡，預(yù)凍時溫度必須低于產(chǎn)品的共晶點(diǎn)溫度，一般應(yīng)低于產(chǎn)品的共晶點(diǎn)溫度至少5℃。

預(yù)凍階段是在常壓下進(jìn)行的，預(yù)凍過程是一個液相轉(zhuǎn)化為固相的變化過程，同時也是一個放熱過程，產(chǎn)品的凍結(jié)過程需要克服凍結(jié)過程中產(chǎn)品釋放的熔化熱，產(chǎn)品的熱量（熔化熱）通過輻射、傳導(dǎo)、對流三種方式傳給板層，板層傳給硅油，硅油的熱量再由冷凍機(jī)帶走，因此預(yù)凍需要維持一定的時間，時間的長短與裝量及容器有關(guān)，也與產(chǎn)品的共晶點(diǎn)有關(guān)，共晶點(diǎn)低的產(chǎn)品，達(dá)到低溫所需時間較長，預(yù)凍時間一般為共晶點(diǎn)5 ℃之下持續(xù)2-3 h。同時，為了改善板層與產(chǎn)品間的熱傳導(dǎo)，應(yīng)盡量增加產(chǎn)品容器與板層的接觸面積，并減少傳遞層次。

預(yù)凍階段的冷凍速率會影響冰晶尺寸的大小，因此也會影響干燥產(chǎn)品的質(zhì)量。冷凍過程中，冰晶的數(shù)量和大小受兩個因素影響，即成核速率和晶體生長速率，而這二者都受溫度的影響。

在0℃時晶體的生長速率增加，而成核速率卻很低，因此在0 ℃保持一段時間，將產(chǎn)生數(shù)量少而尺寸大的晶體，可理解為慢速預(yù)凍（見下圖左），但在0℃以下凍結(jié)時，將得到數(shù)量多且尺寸小的晶體，可理解為快速預(yù)凍（見下圖右）。冰晶的大小也影響干燥速率和干燥后產(chǎn)品的溶解速度和產(chǎn)品質(zhì)量。大的冰晶利于升華，小的冰晶不利于升華；大的冰晶溶解慢，小的冰晶溶解快；冰晶越小干燥后越能反映產(chǎn)品的原來結(jié)構(gòu)。

對于細(xì)胞及一些生命體，冷凍干燥會產(chǎn)生一定的破壞作用，其作用機(jī)理目前尚不明確，一般認(rèn)為是由機(jī)械效應(yīng)和溶質(zhì)效應(yīng)引起的。機(jī)械效應(yīng)是細(xì)胞內(nèi)外冰晶生長而產(chǎn)生的機(jī)械應(yīng)力引起的，特別是對有細(xì)胞膜這樣的生命體影響較大，一般冰晶越大，細(xì)胞膜越易破裂，從而造成細(xì)胞的死亡，冰晶小，細(xì)胞膜的損傷小。

另一方面，產(chǎn)品冷凍時，隨著冰晶的生長，溶液逐漸的濃縮（即電解質(zhì)的濃縮），已知蛋白質(zhì)活性受電解質(zhì)濃度的影響，電解質(zhì)濃度的增加，將誘發(fā)蛋白質(zhì)的變性，造成生命體的死亡。同時，電解質(zhì)濃度增加也會引起細(xì)胞脫水而死亡。

溶質(zhì)效應(yīng)在某一溫度范圍，這個范圍在水的冰點(diǎn)和該液體的固化溫度之間，如果能以較高的降溫速率越過這一溫度范圍，則溶質(zhì)效應(yīng)產(chǎn)生的影響就能減小。因此，針對細(xì)胞及一些生命體的凍干，設(shè)臵合適的預(yù)凍參數(shù)（預(yù)凍時間、溫度等），對于保護(hù)其生命活性，具有較高的意義。

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